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光学显微镜和电子显微镜的区别综述《资讯》

发布时间:2020-08-17 12:47:25 阅读: 来源:压铸模厂家

2018-05-08 07:32:33来源:贤集网 赵媛

提起光学显微镜,相信大家都不陌生,在小学、初中的时候实验课,就会接触到光学显微镜。其实,光学显微镜是一种既古老又年轻的科学工具,从诞生至今,已有三百年的历史。目前,光学显微镜已经进入各行各业,如科研教学、医院、农业、工业检测、刑侦、环保等,成了科学技术的形象代言人。人类的眼睛是比较完善的图像集系统,我们靠双眼观察周围的事物,了解自身和所处的环境。但是对那些小到一定程度的物体或细节,却只能视而不见,这是我们眼睛天生的缺陷,是由人眼的构造决定的。因此通过光学显微镜,将细微物体放大成像,供人观察研究,这极大地弥补了我们眼睛的不足。下面贤集网小编来为大家讲讲光学显微镜和电子显微镜的区别、光学显微镜操作方法、清洁方法、维护要点。

光学显微镜和电子显微镜的区别

1、照明源不同

电子显微镜所用的照明源是电子枪发出的电子流,而光学显微镜的照明源是可见光(日光或灯光),由于电子流的波长远短于光波波长,故电子显微镜的放大及分辨率显著地高于光镜。

2、透镜不同

电子显微镜中起放大作用的物镜是电磁透镜(能在中央部位产生磁场的环形电磁线圈),而光学显微镜的物镜则是玻璃磨制而成的光学透镜。电子显微镜中的电磁透镜共有三组,分别与光学显微镜中聚光镜、物镜和目镜的功能相当。

3、成像原理不同

在电子显微镜中,作用于被检样品的电子束经电磁透镜放大后打到荧光屏上成像或作用于感光胶片成像。其电子浓淡的差别产生的机理是,电子束作用于被检样品,入射电子与物质的原子发生碰撞产生散射,由于样品不同部位对电子有不同散射度,故样品电子像以浓淡呈现。而光学显微镜中样品的物像以亮度差呈现,它是由被检样品的不同结构吸收光线多少的不同所造成的。

4、分辨率

光学显微镜因为光的干涉与衍射作用,分辨率只能局限于02-05um之间。电子显微镜因为采用电子束作为光源,其分辨率可达到1-3nm之间,因此光学显微镜的组织观察属于微米级分析,电子显微镜的组织观测属于纳米级分析。

5、景深

一般光学显微镜的景深在2-3um之间,因此对样品的表面光滑程度具有极高的要求,所以制样过程相对比较复杂。扫描电镜的精神则可高达几个毫米,因此对样品表面的光滑程度几何没有任何要求,样品制备比较简单,有些样品几何无需制样。体式显微镜虽然也具有比较大的景深,但其分辨率却非常的低。 放大倍数:光学显微镜有效放大倍数1000X。电子显微镜有效放大倍数。

6、所用标本制备方式不同

电子显微镜 观察所用组织细胞标本的制备程序较复杂,技术难度和费用都较高,在取材、固定、脱水和包埋等环节上需要特殊的试剂和操作,最后还需将包埋好的组织块放人超薄切片机切成50~100nm厚的超薄标本片。而光镜观察的标本则一般置于载玻片上,如普通组织切片标本、细胞涂片标本、组织压片标本和细胞滴片标本。可达到1000,000X

7、应用领域

光学显微镜主要用于光滑表面的微米级组织观察与测量,因为采用可见光作为光源因此不仅能观察样品表层组织而且在表层以下的一定范围内的组织同样也可被观察到,并且光学显微镜对于色彩的识别非常敏感和准确。电子显微镜主要用于纳米级的样品表面形貌观测,因为扫描电镜是依靠物理信号的强度来区分组织信息的,因此扫描电镜的图像都是黑白的,对于彩色图像的识别扫描电镜显得无能为力。扫描电镜不仅可以观察样品表面的组织形貌,通过使用EDS、WDS、EBSD等不同的附件设备,扫描电镜还可进一步扩展使用功能。通过使用EDS、WDS辅助设备,扫描电镜可以对微区化学成分进行分析,这一点在失效分析研究领域由为重要。使用EBSD,扫描电镜可以对材料的晶格取向进行研究。

光学显微镜操作方法

一、镜检前的准备

1、室内应清洁而干燥,实验台台面水平,稳固无震动,显微镜附近不应放置腐蚀性的试剂。从显微镜柜或镜箱内取出显微镜时,要用右手紧握镜臂,左手托住镜座,平稳地取出,放置在实验台桌面上,置于操作者左前方,距实验台边缘约10cm,镜臂朝自己,镜筒朝前。实验台右侧放绘图用具。

2、调节光源 如需利用外置光源,宜采用散射的自然光或柔和的灯光。直射的太阳光会对观察者的眼睛造成伤害。

① 转动转换器,使低倍物镜对准通光孔。注意,物镜的前端与载物台要保持2厘米的距离。

② 把一个较大的光圈对准通光孔。左眼注视目镜内,右眼睁开,便于以后观察画图。转动反光镜,看到明亮视野。

二、低倍镜观察

1、把所要观察的载玻片放到载物台上,用压片夹压住,标本要正对通光孔。

2、转动粗准焦螺旋,使镜筒缓缓下降,直到物镜接近载玻片。眼睛看着物镜以免物镜碰到玻片标本。

3、左眼向目镜内看,同时反向转动粗准焦螺旋,使镜筒缓缓上升,直到看清物像为止。再略微转动细准焦螺旋,使看到的物像更加清晰。

三、高倍镜观察

转动转换器,选择较高倍数的物镜,用细准焦螺旋调节焦距,到物像清晰为止。

四、油镜观察

油浸物镜的工作距离(指物镜前透镜的表面到被检物体之间的距离)很短,一般在0.2 mm以内,且一般光学显微镜的油浸物镜没有“弹簧装置”,因此使用油浸物镜时,调焦速度必须放慢,避免压碎玻片,并使物镜受损。

1、在低倍镜下找到观察目标,中、高倍镜下逐步放大,将待观察部位置于视野中央,调节光源和虹彩光圈,使通过聚光器的光亮达到最大。

2、转动粗准焦螺旋,将镜筒上旋(或将载物台下降)约2 cm,加一小滴香柏油于玻片的镜检部位上。

3、将粗准焦螺旋缓缓转回,同时注意从侧面观察,直至油镜浸入油滴,镜头几乎与标本接触。

4、从目镜中观察,用细准焦螺旋微调,直至物象清晰。

5、镜检结束后,将镜头旋离玻片,立即清洁镜头。一般先用擦镜纸擦去镜头上的香柏油滴。再用擦镜纸蘸少许乙醚-酒精混合液(2:3),擦去残留油迹,最后再用干净的擦镜纸擦净(注意向一个方向擦拭)。

五、还原显微镜

关闭内置光源并拔下电源插头,或使反光镜与聚光器垂直。旋转物镜转换器,使物镜头呈八字形位置与通光孔相对。再将镜筒与载物台距离调至最近,降下聚光器。罩上防尘罩,将显微镜放回柜内或镜箱中。

光学显微镜清洁方法

一、推荐清洁材料

根据环境按比例调配酒精、乙醚溶液进行光学零件表面清洁工作。

二、推荐清洁步骤

1、用清洁空气吹掉表面浮尘。如果不能吹干净,取两张镜头纸裹在棉签上或将镜头纸折叠使之比要清洁的面积稍大。

2、擦拭光学零件表面时,首先应用石油醚将毛砂面和框擦干净。

3、擦拭圆形零件时,棉花球应从中心向边缘作螺旋线移动,同时棉花球本身也应转动,并顺势将棉球从镜片表面移出,不要在镜片边缘停留,以免留下印迹,如果利用回转器擦拭,则擦拭时,棉球应由中心向边缘作直线移动,棉球本身同时转动(棉球的自转量应略小于一周为宜)。

4、擦拭棱镜时,可将棉球横放于被擦拭的表面,以直线形式进行擦拭。

5、应在相对清洁的房间内擦拭,并用脱脂长绒棉擦拭,棉球上所含的清洗液不宜过多,擦拭时应在分划板刻线的交叉方向移动擦拭,以免将刻线内的填料层擦掉。

6、在擦拭胶合光学零件时,棉球蘸混合液不应过多,以免溶剂侵入胶合层引起脱胶。

7、镀铝加保护膜的反射零件,如果保护膜比较牢,可用蘸少许混合液的棉球或仔细脱脂的砂布擦拭。

8、棉球应卷好,卷棉球的竹棍头部不应外露,以免划伤零件。棉球的大小和形状应随零件的大小和种类不同,一般是圆形零件用圆柱形棉球,平面零件用扁平形棉球,除镀膜表面(特别是反射镁)用松软的棉球外,其余情况下应把棉球卷紧。

9、蘸混合剂的棉球侵入溶剂内时请不要超过三分之一的棉球长度。

注意:

1、擦拭前,操作人员应用洗涤液仔细清洗双手,并用脱脂过的毛巾擦干。

2、操作人员应将室内的一切用具擦拭清洁,有关与光学零件接触的工具、夹具,应进行脱脂。

3、一个棉球只能用来擦拭一遍,用过的棉球,请不要蘸溶剂重复使用。

4、清洁光学器件之前,请去掉手上的戒指及其他饰物,仔细清洗手部并戴上手套。

5、工作中,如手出汗或接触油脂后,需按照要求重新清洗双手。

6、擦拭光学零件,如必须用手拿光学零件的抛光面,请对戴着的手套进行脱脂处理。

7、擦拭带框的光学零件时,应注意不使污垢附着在靠框的周围或框上挂有纤维,不带框的光学零件应不使污垢附着在毛砂面上。

光学显微镜的维护要点

1、必须熟练掌握并严格执行使用规程,按照严格的流程和说明书来操作显微镜。

2、取送显微镜时一定要一手握住弯臂,另一手托住底座。显微镜不能倾斜,以免目镜从镜筒上端滑出。取送显微镜时要轻拿轻放。

3、观察时,不能随便移动显微镜的位置。

4、凡是显微镜的光学部分,只能用特殊的擦镜头纸擦拭,不能乱用他物擦拭,更不能用手指触摸透镜,以免汗液玷污透镜。

5、保持显微镜的干燥、清洁,避免灰尘、水及化学试剂的玷污。

6、转换物镜镜头时,不要搬动物镜镜头,只能转动转换器。

7、切勿随意转动调焦手轮。使用微动调焦旋钮时,用力要轻,转动要慢,转不动时不要硬转。

8、不得任意拆卸显微镜上的零件,严禁随意拆卸物镜镜头,以免损伤转换器螺口,或螺口松动后使低高倍物镜转换时不齐焦。

9、使用高倍物镜时,勿用粗动调焦手轮调节焦距,以免移动距离过大,损伤物镜和玻片。

10、用毕送还前,必须检查物镜镜头上是否沾有水或试剂,如有则要擦拭干净,并且要把载物台擦拭干净,然后将显微镜放人箱内,并注意锁箱。

11、显微镜的保存最好在干燥、清洁的环境中,避免灰尘以及化学品玷污。

上述是贤集网小编为大家介绍的光学显微镜和电子显微镜的区别、光学显微镜操作方法、清洁方法、维护要点。今天,光学显微镜已广泛使用,它包括普通显微镜、立体显微镜、金相显微镜、干涉显微镜以及荧光显微镜等。虽然它们的结构和功能各不相同,但基本原理却是一样的。光学显微镜的主要部件是装在镜筒两端的两组透镜,每组透镜的作用相当于一个凸透镜。对着物体的一组透镜叫物镜,靠近眼睛的一组透镜叫目镜。物镜的作用是将被观察物体放大成一个倒立的实像,然后由目镜把它进~步放大成虚像。因此,通过显微镜最后看到的,是被观察物体倒立的虚像。现代光学显微镜可以将物体的像放大两三千倍,能看清物体万分之一毫米左右的细微结构。

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